Vilka är normerna i den kvantitativa analysen för hepatit C?

Share Tweet Pin it

Hepatit C-viruset kan reproducera i blodceller och orsaka lymfoproliferativa sjukdomar. Tack vare flera mutationer försvagas kroppens immunförsvar, genotyper och subtyper av viruset uppträder. Med korrekt och aktuell identifiering av en viss typ beror på effektiviteten av antiviral terapi. Risken för infektion är att sjukdomen är asymptomatisk. Totalt 15 procent av 100 kan uppleva illamående och kräkningar, viktminskning och feber.

Definition av hepatit C-viruset

Standardhastighet av hepatit C - är storleken på 40 till 60 nm, med majoriteten av lipider i levern på grund av akut eller kronisk sjukdomsförloppet. Hepatit C, nämligen RNA-viruset från Togaviridae-familjen, är extremt beständig, överförd genom blodtransfusion eller användning av icke-sterila föremål, felaktig hygien hos badrumstillbehör, Kvantitativ analys låter dig undersöka blod och identifiera den genetiska strukturen hos det infekterade viruset.

För att hepatit C och dess genotyper ska bestämmas utförs en kvantitativ analys. Beroende på analysatorn kan tre nivåer av förekomst av RNA-virus bestämmas.

Subtypen kan producera olika modifieringar, så analysatorns specificitet och känslighet bör vara hundra procent. Förutom detektering av en sjukdom hos en patient är det nödvändigt att bestämma graden av dess svårighetsgrad. Vissa laboratorier har inte alla data på RNA-virusdefinitionerna, det finns möjlighet till falskt positivt svar.

Studien för hepatit C kommer att vara mer exakt när man studerar sådana indikatorer:

Att uppmärksamma resultaten av dessa indikatorer och allmänna tillståndet hos kroppen, visas resultatet, som indikerar graden av angrepp, formen och antalet celler i blodet hos hepatit C. Detta bidrar till läkningsprocessen och effektiviteten av antiviral terapi.

Typer av analys för hepatit C

Polydiserad kedjereaktion (PCR) ger en uppfattning om mängden DNA-partiklar i patientens analyser och identifierar korrekt orsaksmedlet för infektionen.

Smittämnen kan manifestera sig. En sådan smittsam leversjukdom som hepatit C, är idag behandlingsbar när den detekteras i tid. Om ett virus misstänks görs PCR-analys.

Medan symtomen på viruset kan maskeras under lång tid, kanske en person inte känner till starten av sjukdomsförloppet. Men med en noggrann undersökning i 60-70% av fallen, detekteras hepatit C, en primär analys där den är ELISA, därefter följer PCR-diagnosen. Analysen utförs vid vissa perioder för att bestämma sjukdomsstadiet och förskriva lämplig behandling. Gör utan det, utan att tillämpa alla dessa procedurer kan du, ympa från hepatit.

Kvalitativ och kvantitativ analys

Det finns kvalitativa och kvantitativa analyser. Kärnan i den första är att den bestämmer förekomsten av infektion i blodet. Och det betyder att viruset påverkar friska leverceller. När en patient har antikroppar mot hepatit C utförs ett kvalitativt test omedelbart. Normen som resultatet ska producera är "inte detekterat i blodet". Vid bestämning av virusets koncentration är det ett behov av kunskap om diagnostiksystemets känslighet, eftersom analysen kan utföras av personer som genomgår antiviral terapi. Analysatorens känslighet bör inte understiga 50 IE / ml.

När ett virus detekteras görs en kvantitativ analys, med andra ord en viral belastning som bestämmer virusets koncentration i blodet och sjukdoms svårighetsgrad.

Viral RNA, som är i en viss mängd blod, definieras som norm med en hastighet av 1 ml per 1 cm kubik. Efter kvantifiering av virusbelastningen är det möjligt att bedöma infektionsgraden hos den oinfekterade miljön. Så snart koncentrationen av hepatit C stiger i blodet måste miljön isoleras.

Det är viktigt i de första etapperna att upptäcka graden av hepatitkoncentration för att bestämma takten i rehabilitering. Om hepatit C-frekvensen överskrids med mer än 800 000 IE / ml anses den för hög, med en ökning till en miljon kritisk. Om det kvantitativa intervallet är mindre än 400 tusen IE / ml anses det att förorening av andra kommer att inträffa med mindre sannolikhet. Denna figur gör det klart att hepatit C i kroppen är närvarande i mycket små doser. Analysen kunde inte bestämma det kvantitativa värdet av viruspartiklarnas RNA, så det överfördes flera gånger för noggrannheten i diagnosen.

Resultat av kvantitativ analys

Uppgiften att bestämma mängden virusbelastning i patientens blod är att identifiera infektionsgraden för andra.

Resultat av PCR-analys:

  1. Ett positivt svar betyder att det finns en infektion i det biologiska materialet. Analys låter dig bestämma exakt antal infekterade celler.
  2. Ett negativt svar indikerar avsaknaden av infektion, som var noggrann sökt i kroppen.

Den kvantitativa metoden för hepatit C är korrekt och informativ, utförs på utrustning med hög känslighet. Avkodning av resultaten av analysen låter dig veta om det finns en infektion och dess specificitet för att se det minsta antalet infekterade celler på högkänsliga analysatorer.

Falskt positivt eller motsatta resultat av analysen ger sällan, oftare sker det i studier av immunanalys.

Kvantitativ analys av PCR för hepatit C

Det finns många subtyper av HCV, varför det inte alltid är möjligt att välja effektiva antivirala läkemedel och uppnå de önskade resultaten i behandlingen. Mångfalden av patogener beror på deras förmåga att ändra sin struktur, det vill säga mutera. Som ett resultat har immunitet inte tid att bilda ett kraftfullt svar mot ett patogent medel och läkemedel är ineffektiva.

Ofta diagnostiseras hepatit vid cirrosförloppet, vilket förutspår senare upptäckt av sjukdomen på grund av brist på kliniska tecken. Endast genom laboratorietestning kan HCV detekteras under inkubationsperioden.

Den kvantitativa analysen för hepatit C gör det möjligt att inte bara fastställa förekomsten av patogen i blodet utan också att beräkna dess koncentration.

Rekommendationer för att förbereda analysen

Specifik förberedelse för laboratoriediagnos är inte nödvändig. Det är nog att följa följande rekommendationer:

  1. Den kvantitativa analysen utförs på tom mage, med sista måltiden - 8 timmar före blodprovet.
  2. i två dagar bör överges alkohol och "tunga" rätter;
  3. De läkemedel som patienten tar är av särskild betydelse. De kan påverka resultatet av studien, så läkaren bör veta om dem.

Dessutom är tung fysisk ansträngning och fysioterapeutiska procedurer på tröskeln till blodprovtagning inte önskvärda. För att dechiffrera den kvantitativa analysen för hepatit C visade sig vara tillförlitlig, försumma inte ovanstående rekommendationer.

Ofta får patienten resultatet av analysen på en dag. Priset på testet för att bestämma koncentrationen av patogenen i blodet beror på laboratoriet och kvaliteten på reagensen och kan nå 4 000 rubel.

Laboratoriediagnos av hepatit C

Bland de primära diagnostiska metoderna är ELISA eller på annat sätt en enzymbunden immunosorbentanalys. Det är tilldelat att detektera specifika antikroppar mot HCV. Dess effektivitet når 95%. Om transkriptet av studien ger ett positivt resultat är det värt att misstänka förekomsten av ett medel i blodet.

Det bör noteras att hälften av de försökspersoner som testats med ett "+" -test under ytterligare diagnos inte detekterar ett virusmedel i blodet. ELISA indikerar i detta fall en tidigare kontakt med HCV tidigare, vilket bekräftas av cirkulerande antikroppar.

En mer exakt studie är en polymeraskedjereaktion, annars PCR. Det tillåter att bestämma koncentrationen av RNA hos patogenen i blodet. Efter att ha upptäckt den genetiska uppsättningen av viruset i biologiskt material bekräftar läkaren hepatit C.

PCR tilldelas patienten för att verifiera diagnosen. Det gör det möjligt att identifiera RNA i ett stadium där antikroppar ännu inte är tillgängliga. Det finns flera typer av genetiska studier:

  1. en kvantitativ analys av PCR för hepatit C, som inte bara etablerar förekomsten av patogenen i blodet utan också ger information om dess koncentration;
  2. kvalitet - bekräftar infektion
  3. genotyping - gör det möjligt att bestämma genotypen för ett patogent medel och att välja de mest effektiva drogerna mot det.

Polymeraskedjereaktion

Som redan nämnts finns det flera typer av laboratorieforskning:

  • kvalitativ analys - indikerar förekomsten av ett patogent medel i blodet. Denna typ av diagnos har en viss "nivå av respons", så det är inte alltid tillförlitligt. För att korrekt dechiffrera resultaten och få verkliga indikatorer rekommenderas att man använder ett testsystem med en känslighet på minst 50 IE / ml för studien. Normen för analys är ett "negativt svar" eller "viruset detekteras inte." Detta indikerar brist på en genetisk uppsättning patogener i testmaterialet. Om resultatet var positivt krävs ytterligare undersökning av patienten;
  • kvantitativ analys av PCR för hepatit C bestämmer virusbelastningen, det vill säga koncentrationen av det patogena medlet i blodet. Resultatet av studien visar antalet RNA-enheter i en fast volym av den biologiska vätskan;

Virusbelastning - en räkning av den infektiösa RNA per milliliter blod av testet. Enheter - IU / ml, även om vissa laboratorium bestäms "kopior / ml", medan pekar på tomma analysstandarder för jämförelse och utvärdering.

  • genotypning. På grund av patogenens förmåga att ändra valet av effektiva antivirala läkemedel för behandling bör baseras på dess genotyp. Det beror inte bara på resultatet, men också på behandlingstiden. Så, HCV 1-hepatit kräver mediciner för ett år, men endast 60% av fallen visar positiv dynamik. När det gäller andra och tredje genotyper är de mindre resistenta mot verkan av antivirala medel, varför effektiviteten av behandlingen överstiger 85%. När man får ett sådant resultat av forskningen - "viruset är inte typat" är det värt att misstänka närvaron av ett medel som inte känns igen av standardtestsystem.

Indikationer för analys

Tolkningen av den kvantitativa analysen för hepatit C är nödvändig för:

  1. ytterligare undersökning av patienten när antikroppar mot HCV detekterades med ELISA;
  2. bekräftelse på diagnos
  3. etablering av virusbelastning vid blandad infektion, när en person är infekterad med flera typer av patogener;
  4. bestämning av behandlingstaktik (val av antivirala läkemedel, ersättning eller slutförande av behandlingen);
  5. bedöma dynamiken i sjukdomsprogressionen samt effektiviteten av droger;
  6. bestämning av patologins stadium (akut, kronisk).

PCR har följande fördelar:

  1. god känslighet, tack vare vilken det är möjligt att räkna även en liten mängd av viruset
  2. bestämning av själva patogenen (RNA), inte antigener;
  3. specificitet av tekniken - upprättandet av en specifik typ av patogena medel
  4. Hastigheten att få resultat, för att analysen inte kräver odling av grödor på ett näringsmedium. Svaret är klart om 5 timmar;
  5. universalitet - tillåter att identifiera en genetisk uppsättning olika patogener, både RNA och DNA-innehållande (hepatit B);
  6. upptäckt av latent infektion.

Ett laboratorietest hjälper till att bekräfta diagnosen och är en integrerad del av en omfattande undersökning (analys av kliniska symptom, resultat av ELISA och biokemi).

Dessutom används PCR allmänt i allergologi, genetik, samt att fastställa faderns fakta.

Dekodning av kvantitativ analys för hepatit C-virus

Utvärdering av resultaten av laboratoriediagnostik utförs av en läkare genom att jämföra de erhållna data med normen.

Varianter och nödvändighet att använda PCR-studier

Hepatit C-viruset är ett virus som innehåller en RNA-molekyl. Han kan undvika kroppens immunsvar på grund av höga förmågor för mutation. Det finns sex huvudsakliga genotyper av viruset och många subtyper. I vår region är främst 1, 2 och 3 genotyper vanliga.

I 75-80% av sjukdomen går i kronisk form, vilket orsakar leverfibros - ett tillstånd där levervävnad ersätts med bindväv. Fibros leder i sin tur till cancer eller cirros. Det huvudsakliga sättet att överföra sjukdomen är genom blodet. Om en person har en indikation på ett test för hepatit C, utförs två grundläggande test. Identifiera antikroppar mot viruset, och i sin frånvaro antas det att han inte har hepatit. Om närvaron av antikroppar mot hepatitviruset detekteras i blodet utförs PCR-analysen.

RNA denna metod bestäms i blodet redan 10-12 dagar efter infektion och indikerar att viruset multipliceras aktivt i kroppen. Under denna period är det helt enkelt omöjligt att upptäcka ett virus på ett annat sätt, eftersom det ännu inte producerar specifika antikroppar och leverskador fortfarande är osynliga i biokemiska analyser och biopsier.

Forskningsområden med PCR-metoden

Analys genom polymeraskedjereaktion har vissa fördelar:

  1. Med en sådan studie bestäms själva viruset, inte produkterna av dess vitala aktivitet. I det här fallet är det möjligt att bestämma typen av patogen.
  2. Tekniken har hög specificitet på grund av det faktum att endast en viss region av DNA undersöks minskar sannolikheten för att erhålla felaktiga resultat.
  3. Den har en mycket hög känslighet, även en minimal mängd av viruset i blodet detekteras.

Det finns två huvudmetoder för blodprovning för hepatit C med PCR: kvalitativ och kvantitativ PCR-analys. En kvalitativ metod används för att bestämma närvaron av ett virus. Till alla som hade antikroppar mot hepatit i blodet görs en analys. Resultatet kan bara vara av två typer: "detekterat" och "ej detekterat", det sista värdet anses vara normen.

Ett positivt testresultat innebär att fragment av virus-RNA hittades i provet, vilket i sin tur indikerar att personen var infekterad med hepatit. Vid ett negativt resultat är två alternativ möjliga: det fanns ingen infektion eller koncentrationen är så låg att den inte detekteras med denna teknik.

Den kvantitativa metoden skiljer sig väsentligen i studien, beroende på uppgifterna och indikationerna. Inte alla patienter med hepatit genomgår en sådan analys. Han, precis som någon annan, har särskilda mål. Bestämning av virusbelastning eller kvantitativ analys av PCR på virusets RNA används:

  • att bestämma virusets RNA i blodet och diagnosen "viral hepatit";
  • att förutsäga kronisk hepatit och sjukdomsförloppet;
  • för att övervaka antiviral behandling och bestämma huruvida det ska förlängas, minska eller ändra behandlingens taktik.

Studien utförs om det finns sådana indikationer:

  • hepatit C detekteras i kvalitativ forskning och antikroppar återfinns i blodet;
  • med blandad hepatit;
  • om antiviral terapi är planerad
  • under och efter behandling för hepatit C;
  • i närvaro av kronisk och akut hepatit C.

Testet utförs för att uppskatta antalet virusenheter i en given volym av ett blodprov på 1 cm3 eller 1 ml. Resultaten ges i figurer. Indexen används: IE / ml, vilket betyder den internationella enheten per milliliter och kopior per ml, antalet kopior av RNA i ett 1 ml prov. Ju högre kvantitativ indikator för analysen desto större är sannolikheten för överföring av viruset till en annan person.

P-DNA är en metod för förgrenat DNA. Mer enkel och billig metod. Används för fler prover, har en låg känslighet, från 500 IE / ml. Med sådan känslighet är det möjligt att inte upptäcka viruset, även om det är närvarande i blodet.

TMA är en metod för transkriptionsförstärkning. Denna teknik avslöjar nukleinsyror i blodet. Har en låg kostnad och med samma höga känslighet, 5-10 IE / ml. En relativt ny teknik som gör det möjligt att påskynda och minska kostnaderna för testning.

Resultaten av den kvantitativa analysen av bestämningen av virus-RNA, som presenteras av laboratoriet, tolkas enligt följande:

Analys av PCR för hepatit

PCR PÅ HEPATITIS C

  1. RNA av hepatit C ( "PCR-kvalitet") - detektering vid analys av blod är ett bevis på akut eller kronisk hepatit C bestäms från 2: a veckan av infektion, visas före anti-HCV, vilket tillåter att diagnostisera sjukdomen i ett tidigt skede. Bestämningen av RNA utförs hos personer med klinik med akut hepatit och personer med positiva resultat av analys för hepatit.
  2. RNA av hepatit C ("PCR-kvantitativ") - virusbelastning - en av indikatorerna för effektiviteten av antiviral terapi och dess utvärdering (genom att ändra nivån från initialvärdet). Den kvantitativa karakteriseringen av innehållet i hepatit C RNA är viktigt för att utvärdera effektiviteten av antiviral terapi och är av prognostisk betydelse för bestämning av kroniskhet. Patienter med hög viral belastning (stora mängder RNA) före behandling svarar sämre på behandlingen.
  3. RNA av hepatit C (genotyper 1, 2, 3) - Typ av behandling beror på typen och dess effektivitet. Sjukdomen orsakad av viruset av genotyp 1 är det mest ogynnsamma med avseende på prognosen för effektiviteten av behandlingen. Enligt gällande rekommendationer bör ett blodprov för oss genotypa hepatit C utföras innan antiviralbehandling börjar.
  4. RNA av hepatit C (förlängd genotypning 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - På Rysslands territorium cirkulerar 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a subtyper. Hepatit C, orsakad av viruset av genotyperna 1 och 4, är den mest ogynnsamma med avseende på prognosen.
  5. Ultrasensitiv PCR för hepatit C (kvalitativ metod) - analysen används för att diagnostisera sjukdomen i början av infektionen, är optimal för att testa bloddonation och bedöma svaret på antiviral behandling. Denna studie även om oupptäckta antikroppar mot hepatit C, rekommenderas att genomföra patienter med leversjukdom ospecificerade skäl c förvärvad immunbrist, eller ta emot immunsuppressiv behandling.
  6. Ultrasensitiv PCR för hepatit C (kvantitativ metod) - unik analys med hög känslighet (10 IE / ml) för bestämning av hepatit C-virus-RNA i kvantitativa termer. Studien används för att övervaka effektiviteten av behandlingen.

PCR PÅ HEPATITIS B

  1. Hepatit B-DNA (kvalitativ analys) - Reproduktionsindex för hepatit B-viruset. Visas i blodet först, i genomsnitt 1 månad efter infektion. I vissa fall är det den enda markören för latent HBV-infektion. Bestämning av virusets DNA tillåter att diagnostisera hepatit B orsakad av mutantstammar, i vilka andra markörer av infektion inte detekteras.
  2. Hepatit B-DNA (kvantitativ analys) - DNA-koncentration (virusbelastning) är en av de test som används för att bestämma scenen för kronisk hepatit B och effekten av antiviral terapi. Analysen utförs före och under behandlingen.
  3. Genotyping av hepatit B - sjukdomar som orsakas av olika genotyper av viruset kan skilja sig åt i den kliniska kursen och resultatet. Hepatit B, orsakad av viruset av genotyp C, tar ofta en kronisk kurs och har stor risk för omvandling till levercirros eller hepatocellulärt karcinom. Patienter som är infekterade med genotyp A-virus svarar bättre på behandlingen.
  4. Ultrasensitiv DNA-PCR för hepatit B (kvalitativ metod) - återkallar dem för tidig upptäckt av sjukdomen. Mycket informativ i studien av blod från givaren. Kan användas för att bekräfta spontan eller behandlingsinducerad avlägsnande av viruset från människokroppen.
  5. Ultrasensitiv PCR för hepatit C (kvantitativ metod) - diagnos av hepatit B-virus DNA i kvantitativa termer. Analysen är vidtagen för att utvärdera effektiviteten av behandlingen.
  6. Bestämning av mutationer av resistens mot antivirala läkemedel lamivudin, telbivudin, entecavir, adefovir, tenofovir (ges tillsammans med analysen av "hepatit B-kvantitativt DNA"). För att klara analysen är det nödvändigt för patienter med kronisk hepatit B före början av antiviral behandling och under administrering av läkemedel. Resultatet innehåller information om tillgången på resistens mot hepatit B-virus mot antivirala läkemedel:
    • R - viruset är resistent mot det antivirala läkemedlet (resistansmutationer till detta läkemedel har detekterats);
    • S - hepatit B-viruset är känsligt för läkemedlet (noralvärdet, mutationer av resistens detekteras inte);
    • Jag - orsakssambandet till infektion kan ge resistens mot detta läkemedel.

№350SV, Kvantifiering av HCV RNA genom PCR [virusmängd] (HCV virusmängd, hepatit C-virus-RNA (Kvantitativ test)) i serum

Bestämning av hepatit C-virus-RNA i serum genom polymeraskedjereaktion (PCR) med realtidsdetektering.

det detekterbara fragmentet är en specifik region av hepatit C-virus-RNA; bestämningens specificitet är 100%. Känsligheten för bestämningen är 60 IE / ml. Linjärt intervall: 10 ^ 2 - 1x10 ^ 8 IE / ml.

  • Positivt kvalitativt test för förekomsten av RNA hos hepatit C-virus i blodserumet.
  • Bestämning av viral belastning.
  • Fastställande av taktik för behandling av patienter.
  • Noggrann utvärdering av behandlingseffektivitet.

Tolkning av resultaten av forskningen innehåller information till den behandlande läkaren och är inte en diagnos. Information från detta avsnitt kan inte användas för självdiagnos och självbehandling. En noggrann diagnos görs av läkaren, med hjälp av både resultaten av denna undersökning och nödvändig information från andra källor: anamnes, resultaten av andra undersökningar etc.

Måttenheter: mängden RNA av hepatit C-virus, uttryckt i IE / ml. För att räkna om i exemplar / ml ska förhållandet IU = 2,5 kopior av HCV RNA appliceras.

  • Grundläggande information
  • Exempel på resultat

* tidsfristen omfattar inte dagen för att ta biomaterialet

PCR med realtidsdetektering.

exempel på resultat på formuläret *

* Vi uppmärksammar att när flera beställningar beställs kan flera testresultat återspeglas i en form.

I det här avsnittet kan du ta reda på hur mycket genomförandet av forskningen i din stad, läsa beskrivningen av testet och tolkningen av resultattabellen. Välja var som skall testas, "Kvantifiering av HCV RNA genom PCR [virusmängd] (HCV virusmängd, hepatit C-virus-RNA (Kvantitativ test)) i serum" i Moskva och andra ryska städer, glömmer inte att analysen av pris, Kostnaden för provtagningsproceduren för biomaterial, metoder och tidpunkt för forskning i regionala sjukhus kan skilja sig.

Hepatit C. Kvantitativ analys. Norm, tolkning av resultaten

Hepatit C. Vad det är farligt för människor. Hur man diagnostiserar en infektion. Vad du behöver göra analysen

Hepatit C-virus. Det är farligt. Så här identifierar du det i tid.

Hepatit C-virus eller HCV är en infektionssjukdom som bär en ribonukleinsyramolekyl.

Denna typ av virus kan enkelt anpassas till levnadsförhållandena och omvandlas ofta till olika former av sjukdomen, så vår kropps defensivsystem är så svår att hantera. Sex stora genetiska typer av infektion och dussintals subtyper klassificeras. I vår region finns de tre första typerna av virus ofta.

Enligt statistiken förekommer endast en fjärdedel av fall av HCV-sjukdom utan komplikationer, i alla andra fall normen, om infektionen utvecklas till en kronisk process som negativt påverkar de inre organen. Så hepatit kan vara komplicerat av hepatisk fibros - processen att ersätta leverceller. Ytterligare komplikationer utvecklas genom en kedjereaktion: som en följd av fibros finns cancer tumörer, leversjukdom utvecklas till cirros.

I de flesta fall kommer infektionen in i människokroppen genom blodkärl. Diagnosera hepatit C-viruset på flera sätt. Övervaka koncentrationen av antikroppar mot HCV. Infektion inträffade inte om antikroppar mot henne inte fanns i patientens blod. Annars studeras viruset djupare, ett annat test utförs - PCR. Endast denna metod medger identifiering av viralt RNA efter endast en och en halv veckor efter infektion, vid en tidpunkt då kroppen inte har tid att starta produktion av antikroppar till infektionen, och kontamineringseffekter återspeglas inte i det allmänna tillståndet, särskilt i resultaten av andra studier, såsom BAC och biopsi.

Analys av PCR på RNA: kvantitativ och kvalitativ. Förklaring av resultat

Viral belastning eller kvantitativ PCR-analys - en analys för bestämning av infektionsnivån i plasma. I själva verket är kvantitativ analys antalet molekyler av infektiös ribonukleinsyra i en milliliter blod.

P-DNA är ett snabbt, billigt och inte det mest exakta kvantitativa sättet att upptäcka ett virus baserat på detektering av celler av förgrenat DNA. Detta test kan inte identifiera infektionen som finns i kroppen på grund av dålig känslighet - cirka 450 IE / ml.

Den kvantitativa metoden för transkriptionsförstärkning gör att man kan hitta RNA-celler i kroppen. Denna metod framträdde relativt nyligen, det är billigt och är ett tillräckligt effektivt diagnostiskt verktyg. Testets känslighet är cirka 10 IE / ml.

Låt oss försöka förklara resultaten av testen. Nedan finns en tabell och ett transkript.

PCR-studie för hepatit C: typer, indikationer, transkript

Viral hepatit C är en allvarlig sjukdom som uppstår med leverskador. I åttio procent av patienterna passerar den i kronisk form. Viruset multiplicerar i leverceller - hepatocyter - och orsakar deras död. Död vävnad ersätts av foci av bindväv, fibros utvecklas.

Med utvecklingen av leverfibros är oförmögen att utföra sin funktion börjar cirros, som är farlig för dess komplikationer: ökat tryck i portådern, gastrointestinal blödning, försämrad blodkoagulering, mentala förändringar på grund av hjärnskada kärnor giftiga produkter.

Orsaken till sjukdomen är infektion med ett virus från familjen Flaviviridae, vilket är en typ av RNA-virus. Detta innebär att det genetiska materialet genom vilket patogener av patogenen syntetiseras kodas i en molekyl av ribonukleinsyra. Infektion sker genom blodet, sexuellt, och från en gravid kvinna till fostret. Tyvärr kan mellan infektion och början av produktionen av antikroppar passera en ganska stor tid - från två veckor till sex månader. Detta tillåter inte att bestämma infektionen genom metoden för enzymimmunanalys och starta behandling i de tidiga stadierna.

Vad är PCR-analys?

PCR är en metod för molekylär analys som möjliggör detektering av patogenens genetiska material så tidigt som den första veckan efter infektion med användning av en polymeraskedjereaktion. Studien har hög specificitet, noggrannhet och gör det inte bara möjligt att bestämma närvaron eller frånvaron av viruset utan även dess koncentration och genotyp.

För undersökningen, ta patientens blod, där virusets RNA potentiellt kan hittas. I blodet tillsätts primrar-artificiellt syntetiserade delar av den önskade genen med liten längd och RNA-polymeras är ett speciellt enzym som multiplicerar mängden genetiskt material av patogenen. Med hjälp av en speciell apparat utförs flera cykler av uppvärmning och kylning. Materialet analyseras sedan och jämförs med kända virusgener, på grundval av vilket en slutsats görs om närvaron eller frånvaron av infektion.

Typer av PCR-analys för hepatit C

Det finns tre typer av PCR-analys:

  1. Kvalitativ PCR-analys. Den första etappen av studien. Det låter dig identifiera virusets genetiska material i blodet.

  • Kvantitativ analys av PCR. Det gör det möjligt att bestämma virusbelastningen - koncentrationen av patogenens genetiska material i en milliliter blod. Denna studie utförs före behandlingsstart och därefter på den första, fjärde, tolfte och (om lång kurs) den tjugofjärde veckan av behandlingen, för att bedöma dess effektivitet.

  • genotypning. Det orsakande agenset av hepatit C muteras ofta och snabbt. På planeten hittades sju varianter av genotypen av detta virus. I Ryssland är den första, andra och tredje typen vanliga. Var och en har en olika genotyper resistenta mot terapi, är en sådan behandling effektiviteten av den första typen sextio procent, och den andra och tredje siffran är åttiofem. Därför, för att välja lämpliga mediciner och ordinera en behandling måste vara tillräckligt lång för att avgöra exakt vilken typ av virusinfekterade patient.
  • Indikationer för PCR-analys för hepatit C

    PCR-studie föreskrivs i följande fall:

    • kontakt med en sjuk person som kan leda till infektion
    • positiv enzymbunden immunoanalys;
    • tecken på levercirros: förändringar i leverstorlek, förstorad mjälte, utseende av subkutan venös plexus på buken;
    • Utseendet på symtom på leverskador: smärta i höger sida av buken, hudförgyllning;
    • ökad aktivitet av ALT och AST vid biokemisk blodanalys;
    • innan behandlingen påbörjas för att bestämma virusbelastningen
    • att övervaka effekten av antiviral terapi;
    • efter avslutad behandling för att övervaka återfall
    • i närvaro av diagnostiserad hepatit B, för att utesluta blandad leverskada.

    Avkodning av PCR-studie för hepatit C

    Avkodning av PCR-analys och enzymimmunanalys för hepatit C bör behandlas av en specialist på hepatolog eller infektionssjukdom. Analysera resultaten av PCR är nödvändig i kombination med biokemiskt blodprov, biopsi och ultraljud. Endast en kvalificerad läkare kommer att kunna analysera resultaten av studierna och, baserat på dem, förorda rätt behandling.

    Dekodning av kvalitativ analys.

    Patogenens genetiska material hittades i det analyserade biologiska materialet. Infektion bekräftas.

    Det finns ingen infektion, eller mängden RNA för patogenen ligger under känslighetsgränsen.

    Dekodning av kvantitativ analys.

    En vanlig siffra för friska människor. Det betyder att det inte finns något hepatit C-RNA i testmaterialet, eller dess koncentration ligger under undersökningens känslighetsgräns.

    Koncentration av RNA ligger under kvantifieringsområdet. Sådana resultat tolkas mycket försiktigt, korrelerar dem med data från andra studier, utför ofta en andra studie.

    Nivån av viral belastning vid en given koncentration anses vara låg. Vanligen innebär en minskning av virusets mängd att behandlingen är framgångsrik.

    Mer än 8 * 10 ^ 5 IE / ml

    Nivån av viral belastning vid en given koncentration anses hög.

    Mer än 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

    Mängden RNA ligger över den övre gränsen för kvantifieringsintervallet. Slutsatser om graden av virusbelastning med detta resultat är omöjliga. Vanligtvis i sådana fall upprepas testet med utspädningen av blodprovet.

    Dekodning av genotypning.

    RNA av en specifik genotyp detekterades

    I biomaterialet detekteras hepatit C-virus av en specifik genotyp och subtyp. Resultatet kodas i romerska siffror och latinska bokstäver, till exempel - 1a, 2b. Det finns sju genotyper och tresju sju deltyper, men i Ryssland finns det bara tre första typer.

    Hepatit C-virus-RNA detekterades

    I blodet finns RNA en sällsynt genotyp för Ryssland, som inte kan hänföras till den första, andra eller tredje typen. Mer forskning behövs.

    Detta resultat indikerar att patienten är frisk, eller att patogenens RNA-nivå är för liten.

    En situation är möjlig när PCR-analysen för hepatit C är negativ, och enzymimmunanalysen detekterar antikroppar mot viruset. Detta innebär att patienten har haft hepatit C i akut form och läkt sig själv. Cirka tjugo fall av infektion resulterar i spontan botemedel om patientens kropp utövar tillräcklig resistens mot infektion.

    Trots att PCR är en mycket noggrann analys kan dess resultat snedvrids i följande situationer:

    • blod transporterades till laboratoriet under otillräckliga förhållanden, temperaturregimen bröts
    • provet av biomaterialet var kontaminerat;
    • i blodet fanns kvarvarande spår av heparin och andra antikoagulantia;
    • I det undersökta ämnet var hämmare - substanser som saktar eller stoppar polymeraskedjereaktionen.

    Fördelar med PCR över andra metoder

    1. Diagnos i de tidiga stadierna. PCR detekterar det genetiska materialet hos orsakssjukdomens orsaksmedel. Med hjälp av immunofluorescensanalys är det möjligt att bestämma endast immunoglobuliner - ämnen som kroppen producerar som svar på infektion. I fallet med hepatit C-infektion kan intervallet mellan infektion och uppkomsten av immunsvaret vara flera veckor och månader, vid vilken tidpunkt ELISA kommer att vara ineffektivt. PCR kommer att ge ett svar redan under den första veckan efter infektion.

  • Låg sannolikhet för fel. I det studerade materialet bestäms det genetiska materialet, vilket endast är karakteristiskt för en typ av patogener. Detta låter dig utesluta falska resultat. Med ELISA är fel möjliga, eftersom samma antikroppar kan släppas mot olika virus - sådana antikroppar kallas korsreaktiva.

  • Hög känslighet. PCR kan detektera patogenens RNA även i minimala mängder. Detta gör det möjligt att identifiera dolda infektioner.
  • Hur man förbereder sig på blodleverans för PCR-forskning

    För PCR-analys samlas venös blod för hepatit C. Vanligtvis tas två delar av blod från patientens vena samtidigt: den första skickas för PCR och den andra för ELISA. Detta görs för att mer exakt kunna bedöma hur dåligt patienten är infekterad med viruset och hur immunitet kämpar mot det.

    Vanligtvis krävs följande regler för patienten:

    • ett blodprov tas på morgonen;
    • pausen mellan den sista måltiden och blodets leverans bör vara åtta till tio timmar;
    • två eller tre dagar före analysen måste du ge upp stekt och fet mat och alkohol;
    • i tjugofyra timmar före analysen, bör patienten undvika fysisk ansträngning: bär inte vikter, gå inte i gym eller pool.

    Markörer av hepatit C och tolkning av resultaten av kvantitativ analys av HCV RNA

    Nyligen, i sökmotorerna av Internet-resurser framträder efterfrågan "kvantitativ analys för hepatit med avkodning" alltmer.

    Faktum är att hepatitvirus är vanlig och farlig, sjukdomen påverkar levern. Dess namn kom från lat. hepatit - leverinflammation. Infektion sker genom blodet eller genom sexuell kontakt, vuxna är mer benägna att bli sjuk i åldern 25-50 år.

    Det finns flera typer av denna sjukdom. Hepatit C har inte en ljus svårighetsgrad men 40-70% av fallen blir kronisk, kan orsaka skrumplever och cancer. Denna sjukdom kräver noggrann diagnos och tolkning av de erhållna data, för vilka metoderna utvecklas. En är RNA-analys av HCV-RNA genom PCR.

    RNA-analys av HCV-RNA genom PCR

    RNA (ribonukleinsyra) är en slags makromolekyl, en av komponenterna i en levande cell. RNA ansvarar för kodningen av genetisk information. Hepatit C-viruset innehåller en RNA-molekyl och har vana att mutera. Det finns sex av dess undertyper, liksom många undertyper.

    Sjukdomen i sitt kroniska stadium leder till fibros av levern - bindväv växer, organets struktur bryts gradvis. Fibrosis är mottaglig för snabb behandling, eftersom levern inte har genomgått destruktiva processer. Till skillnad från cirros, en allvarlig irreversibel leversjukdom, där fibros kan utvecklas utan att vidta nödvändiga åtgärder i tid.

    En person med misstanke om att ha ett hepatitvirus bestämmer antikroppar mot det. Om de inte är närvarande - utesluts sjukdom, vid deras närvaro tillgriper en metod PTSR (polimeraznoj kedjereaktion). I molekylärbiologi är det experimentell men tar en ledande plats bland metoderna för att diagnostisera infektionssjukdomar. Med hjälp av det kan man avsevärt öka koncentrationen av molekyler i provet. 10 dagar efter infektion är RNA redan möjligt att detektera i blodet.

    Denna metod är den enda som tillåter att identifiera sjukdomen i de tidiga stadierna. På andra sätt (t.ex. ett biokemiskt blodprov) kan detta inte göras, eftersom levern ännu inte påverkas.

    Metoden upptäcktes 1993 av biokemist Carrie Mullis, för vilken han fick Nobelpriset. PCR var ett genombrott i medicin och vetenskap, eftersom det medgav snabb och korrekt identifiering av infektioner i blodet och andra biologiska material hos en person. Metoden accelererar med andra ord utvecklingen av diagnosen infektionssjukdomar.

    RNA-analys av HCV RNA genom PCR är effektiv av följande skäl:

    • Har en bra känslighet - även en liten del av viruset i blodet upptäcks.
    • själva viruset är bestämt, och inte biprodukter som skapats av det;
    • typ av patogen bestäms.

    Skillnader i kvantitativ analys av HCV RNA från en kvalitativ

    PCR-metoden innehåller två grundläggande metoder för att studera biologiskt material för sökandet efter hepatit C-viruset:

    Dessa studier har olika uppgifter.

    Kvalitativ analys för hepatit med avkodning bekräftar närvaron av viruset efter det att antikropparna mot sjukdomen redan har hittats i blodet. Om studien gav ett positivt resultat, upptäcktes sjukdomen. Med andra ord är en person smittad. Om ett negativt resultat uppnås betyder det att personen inte är infekterad eller att viruset är för lite. Denna koncentration detekteras inte på detta sätt.

    Dessutom är den kliniska bilden av sjukdomen baserad på hepatit C-markörer och tolkning av analysen. Huvudmarkörerna är immunoglobuliner (antikroppar) M och G. Deras närvaro i patientens blod indikerar en okarakteristisk process för en hälsosam organism. Baserat på förekomsten av dessa antikroppar diagnostiseras patienten vanligtvis med en primär diagnos.

    Kvantitativ analys föreskrivs för initial detektion av antikroppar och vid behov behandling.

    Dessutom föreskrivs en kvantitativ analys för hepatit C för detektering av blandad hepatit (infektion med flera virus).

    Den kvantitativa analysen med avkodning utförs med syftet:

    • förtydligande av den slutliga diagnosen;
    • anpassning av förutsägelser avseende sjukdomsförloppet och dess behandling - förlängning, minskning av behandling eller förändring i taktik;
    • övervakning av terapi.

    För att säkerställa att resultaten är korrekta måste du följa föreskriven behandling innan du donerar blod:

    • kom till laboratoriet på tom mage, sista gången du kan ta mat kan vara 8 timmar före proceduren;
    • två dagar före studien är alkohol, fet och stekt mat förbjuden
    • ultraljud, massage, fysioterapi innan studien kan inte utföras;
    • För dagen är mottagande av läkemedel förbjuden, om mottagandet av enskilda droger inte kan avbrytas, rapporteras detta före blodprovtagning.
    • före proceduren rekommenderas att minska de fysiska och nervösa belastningarna så mycket som möjligt.

    Uppfyllandet av dessa krav kommer att vara nyckeln till att erhålla de rätta resultaten av kvantitativ analys för hepatit C.

    Dekodning av kvantitativ analys

    Efter att ha fått kvantitativa analysindikatorer är det nödvändigt att dechiffrera resultaten av testen för hepatit C. Resultaten beräknas både i enheter av ME / ml och i kopior per ml. För att få de resultat som återges i kopian används flera metoder.

    • HCV Monitor (omvandlingsfaktor till ME - 2,7);
    • LCX HCV RNA (omvandlingsfaktorn för ME är 3,8).

    Tabell. Avkodning av kvantitativ analys av HCV RNA genom PCR.

    Hepatit med kvantitativ analysavkodning

    Hepatit C-viruset kan reproducera i blodceller och orsaka lymfoproliferativa sjukdomar. Tack vare flera mutationer försvagas kroppens immunförsvar, genotyper och subtyper av viruset uppträder. Med korrekt och aktuell identifiering av en viss typ beror på effektiviteten av antiviral terapi. Risken för infektion är att sjukdomen är asymptomatisk. Totalt 15 procent av 100 kan uppleva illamående och kräkningar, viktminskning och feber.

    Definition av hepatit C-viruset

    Standardhastighet av hepatit C - är storleken på 40 till 60 nm, med majoriteten av lipider i levern på grund av akut eller kronisk sjukdomsförloppet. Hepatit C, nämligen RNA-viruset från Togaviridae-familjen, är extremt beständig, överförd genom blodtransfusion eller användning av icke-sterila föremål, felaktig hygien hos badrumstillbehör, Kvantitativ analys låter dig undersöka blod och identifiera den genetiska strukturen hos det infekterade viruset.

    För att hepatit C och dess genotyper ska bestämmas utförs en kvantitativ analys. Beroende på analysatorn kan tre nivåer av förekomst av RNA-virus bestämmas.

    Subtypen kan producera olika modifieringar, så analysatorns specificitet och känslighet bör vara hundra procent. Förutom detektering av en sjukdom hos en patient är det nödvändigt att bestämma graden av dess svårighetsgrad. Vissa laboratorier har inte alla data på RNA-virusdefinitionerna, det finns möjlighet till falskt positivt svar.

    Studien för hepatit C kommer att vara mer exakt när man studerar sådana indikatorer:

    Att uppmärksamma resultaten av dessa indikatorer och allmänna tillståndet hos kroppen, visas resultatet, som indikerar graden av angrepp, formen och antalet celler i blodet hos hepatit C. Detta bidrar till läkningsprocessen och effektiviteten av antiviral terapi.

    Typer av analys för hepatit C

    Polydiserad kedjereaktion (PCR) ger en uppfattning om mängden DNA-partiklar i patientens analyser och identifierar korrekt orsaksmedlet för infektionen.

    Smittämnen kan manifestera sig. En sådan smittsam leversjukdom som hepatit C, är idag behandlingsbar när den detekteras i tid. Om ett virus misstänks görs PCR-analys.

    Medan symtomen på viruset kan maskeras under lång tid, kanske en person inte känner till starten av sjukdomsförloppet. Men med en noggrann undersökning i 60-70% av fallen, detekteras hepatit C, en primär analys där den är ELISA, därefter följer PCR-diagnosen. Analysen utförs vid vissa perioder för att bestämma sjukdomsstadiet och förskriva lämplig behandling. Gör utan det, utan att tillämpa alla dessa procedurer kan du, ympa från hepatit.

    Först kommer en kvalitativ analys, som endast bekräftar hypotesen om infektion, och sedan en kvantitativ, som bestämmer belastningen på levern. Det ideala alternativet är ett negativt resultat för hepatit C i patientens genetiska material.

    Kvalitativ och kvantitativ analys

    Det finns kvalitativa och kvantitativa analyser. Kärnan i den första är att den bestämmer förekomsten av infektion i blodet. Och det betyder att viruset påverkar friska leverceller. När en patient har antikroppar mot hepatit C utförs ett kvalitativt test omedelbart. Normen som resultatet ska producera är "inte detekterat i blodet". Vid bestämning av virusets koncentration är det ett behov av kunskap om diagnostiksystemets känslighet, eftersom analysen kan utföras av personer som genomgår antiviral terapi. Analysatorens känslighet bör inte understiga 50 IE / ml.

    När ett virus detekteras görs en kvantitativ analys, med andra ord en viral belastning som bestämmer virusets koncentration i blodet och sjukdoms svårighetsgrad.

    Viral RNA, som är i en viss mängd blod, definieras som norm med en hastighet av 1 ml per 1 cm kubik. Efter kvantifiering av virusbelastningen är det möjligt att bedöma infektionsgraden hos den oinfekterade miljön. Så snart koncentrationen av hepatit C stiger i blodet måste miljön isoleras.

    Det är viktigt i de första etapperna att upptäcka graden av hepatitkoncentration för att bestämma takten i rehabilitering. Om hepatit C-frekvensen överskrids med mer än 800 000 IE / ml anses den för hög, med en ökning till en miljon kritisk. Om det kvantitativa intervallet är mindre än 400 tusen IE / ml anses det att förorening av andra kommer att inträffa med mindre sannolikhet. Denna figur gör det klart att hepatit C i kroppen är närvarande i mycket små doser. Analysen kunde inte bestämma det kvantitativa värdet av viruspartiklarnas RNA, så det överfördes flera gånger för noggrannheten i diagnosen.

    Vad är PCR?

    Idag finns det många olika sjukdomar. Och inte mindre antal metoder för deras beslutsamhet. Eftersom infektionsmedel har lärt sig att lätt bli vana vid miljön och utvecklas, används den senaste tekniken för att diagnostisera dem. Polymeraskedjereaktion (PCR) är en snabbare och mer exakt metod, som syftar till att hitta orsakssambandet hos sjukdomen, genom att väsentligen öka andelen av DNA i hepatitviruset i provet. Det är ofta skrivet om: letar efter en nål i en höstack och bygger sedan en stapel nålar.

    Typer av PCR-metod

    Markera en kvalitativ och kvantitativ analys för hepatit. För att bestämma om viruset är i kroppen, och de som har funnit antikroppar mot hepatit C, utför kvalitativ testning. Analysanalysen ger resultatet: "positivt"; "Negativa". Negativ betydelse betyder: antingen personen är frisk, eller agenter i blodet är inte tillräckligt och de kan inte hittas. Därför är det värt att genomföra en andra studie efter ett tag.

    Ett positivt resultat indikerar förekomsten av en infektion. Detta är nästan alltid ett exakt värde. Felaktiga resultat beror vanligtvis på den mänskliga faktorn (felaktig lagring eller bristande överensstämmelse med procedurreglerna). När normen är resultatet negativt. Före provet finns inga speciella regler, bara ta blod från venen.

    Om det finns en kvantitativ analys (virusbelastning) - det ger numeriska värden: hur mycket RNA hos hepatitvirusen är för närvarande i den föreskrivna volymen av testmaterialet. Med aktiv utveckling av infektionen kan den hittas hos den infekterade personen i 1-2 veckor. Blodet undersöks också vanligen eftersom agenterna i det cirkulerar fritt.

    Egenskaper hos kvantitativ PCR-analys

    Skillnaden i den kvantitativa analysen är att inte alla passerar. Kvalitativ - bestämmer närvaron och kvantitativ - hjälper till med bekräftelsen av slutsatsen "hepatitvirus", prognosen för sjukdomsförloppet och bestämning av behandlingsförloppet. Hur effektiv är terapin, titta på antalet RNA före och under behandlingen. Det används också för att bestämma dosen av läkemedel.

    vittnesbörd

    Som regel produceras den före återhämtningens början. Huvudindikationerna kan vara:

    • definitionen av virusbelastning och kontroll av antiviral terapi;
    • kvalitativa PCR hittade hepatit C antikroppar;
    • finna akut och kronisk hepatit C;
    • förekomst av blandad hepatit;
    • vid planering av behandling
    • om en kvalitativ studie fortfarande upptäcker sjukdommens närvaro efter den tolfte behandlingsveckan.

    Titta också på vilken typ av virusbelastning för hepatit: lågterapi är framgångsrik; förhöjd - behandlingen är inte effektiv och den behöver ändras.

    Vad görs på olika stadier av sjukdomen?

    Vid olika faser av sjukdomen utförs studien för att ge en översyn av fördelarna med behandling och planera hur lång tid det ska genomföras. Med bra svar på terapi förkortas det. I annat fall förlängs behandlingstiden med långsam tillbakadragande av viruset. PCR för hepatit görs vid 1,4, 12, 24 veckors behandling. När indikatorerna inte släpper efter 12 veckor, drar de slutsatsen att terapi inte är lämplig för denna organism. Denna analys används för att fastställa hur aktiv infektionen är och hur sannolikt den ska överföras. Till exempel, under graviditeten finns risk för infektion av en baby. Efter behandling identifieras risken för återfall.

    transkriptet

    Efter studien kan analysen avkrypteras inte i antal, men med orden: "under mätområdet" och "ej detekterat". Kvantitativ PCR är känsligare för kvalitet. Slutsatsen "inte hittad" kan säga att smittan inte hittas. "Under mätområdet" - testet upptäcktes inte av viruset, men det är i en liten mängd. Gör en andra studie i den här situationen.

    Viral belastning - bestämning av antalet infektiösa RNA i den fastställda volymen av blod (kvantitativt 1 ml = 1 kubikcentimeter). Den formuleras i internationella mätningar ME / ml. Individuella laboratorier betecknar kopior / ml. Dekryptera översättningen av komponenter i internationella värden, olika testsystem kan på egen väg. Tabell 1. Dekodning av den kvantitativa analysen av virus-RNA

    Normen för kvantitativ analys för hepatit C

    När en person är frisk är normen - "inte hittad". Drabbade människor norm kommer att minska i dosering av virusresulterar i en logaritmisk enhet, som yttrar sig minska antalet nollor i analysen med ett (t ex 1 * 106 IU / ml till 1 * 105 IU / ml). Rammen för virusets koncentrationsområde, som bestämmer termocyklern, ligger inom gränserna för 1,8 * 102 - 2,4 * 107 IE / ml. Tolkningen av resultatet:

    • låg koncentration - från 600 IE / ml till 3 * 104 IE / ml;
    • genomsnittligt - från 3 * 104 IE / ml till 8 * 105 IE / ml;
    • Hög - över 8 * 105 IE / ml.

    avvikelser

    Om resultaten av analyserna ändras utanför normen kan detta indikera en återkomst av sjukdomen och reproduktionen av viruset. Vissa faktorer kan påverka mottagandet av ett opålitligt resultat, till exempel förorening av prover. närvaron i heparinhalten och substanser som saktar effekten av PCR-komponenter; laboratoriefel; bristande överensstämmelse med testet.

    Resultatet i flera laboratorier kan också variera, kanske var det en annan forskningsmetodik. För att veta hur mycket levern påverkas och risken för sjukdomen är det inte tillräckligt att kvantifiera hepatit-PCR. Dessutom utförs biokemiska förfaranden och biopsi.

    Vid planering av behandlingen är viruset genotyperat. På grund av att hepatit C kan förändras finns det flera grupper. För olika typer av behandling kan det vara annorlunda. Det finns situationer där det finns flera arter, men analysen finner en, som råder. Då kommer testet att retakenas.

    Fördelarna med metoden

    PCR-tekniken gör det möjligt att ge en åsikt och förskriva korrekt behandling. Fördelarna med metoden:

    • Resultatens hastighet kräver inte åtskillnad och odling av patogenens art. Automatisering av processen gör att du kan bearbeta och studera materialet med ett resultat på 4-5 timmar.
    • Direkt bestämning av patogenen - att hitta en särskild del av DNA, indikerar direkt förekomsten av sjukdomen. Till exempel, ELISA - finner proteinmarkörer (produkterna i bakteriernas livstid), vilket inte ger en exakt bekräftelse på sjukdommens närvaro.
    • Specificitet - ett ämne som är specifikt för en viss patogen undersöks, vilket utesluter reaktion på falska ko-reaktiva medel.
    • Sårbarhet - kan detektera det minsta antalet virus.
    • Universitet - bygger på att hitta fragment av DNA eller RNA av specifika organismer. Detta gör det möjligt att utföra diagnostik för alla agenter från ett biomaterial, om andra metoder är maktlösa.
    • Det avslöjar inte bara uppenbara men också dolda infektioner - det är effektivt för att studera agenter av svårt odlade, inte odlade, ihållande.
    • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

    Genom denna forskning kan varje person diagnostiseras med en diagnos av sjukdomsbristen. Men för tillförlitliga fakta måste du följa anvisningarna. PCR används inom olika områden: kriminalteknik, faderskaps, för att diagnostisera olika virus, för detektering av allergier mot läkemedel, genkloning, mutagenes, sekvensering av DNA.

    När är virusbelastningstestet tilldelat?

    Denna studie har tilldelats en läkare i händelse av ett positivt svar vid diagnos av hepatit C. Som regel ska det utses samtidigt med analys för att fastställa genotypen av hepatit C. Hur ser avkodning av kvantitativ analys för hepatit C? Först av allt visar denna analys hur patienten är infekterad och därför smittsam. Kvantifieringen av viruset i blodet kan också avgöra hur effektivt behandlingsschemat är. Läkare ordinerar det efter 4, 12 och 24 veckors behandling. Att minska nivån av viral belastning antyder att terapin valdes korrekt. Analysen administreras också efter 24 veckor från slutet av behandlingen.

    Studier har visat att graden av virusbelastning inte alltid påverkar graden av utveckling av patologiska processer i levern. Fall av bäraren av viruset indikerar att personen själv inte får vara infekterad med hepatit C, men vara en källa till infektion hos andra människor. Dessutom kan bärare när som helst bli sjuk. Hepatit C-viruset aktiveras med minskad immunitet, till exempel efter lider av akut respiratorisk virusinfektion, influensa, svår stress eller hypotermi.

    Hepatit C-överföringsmetoder

    Infektion med hepatit C kan:

    • genom blodet. Möjlig infektion med transfusion av förorenat blod under operationer och manipulationer med blod, tandbehandling, avlägsnande av mol och vorter, om det har funnits fel i steriliseringsinstrument;
    • i skönhetssalonger när man utför tatuering, piercing, kantar manikyr och pedikyr, kosmetisk rengöring av ansiktet, etc.;
    • från moder till barn under födseln (5%);
    • under oskyddad sex med en infekterad person
    • vid injicering av läkemedelsanvändning inte med engångssprutor;
    • när första hjälpen ges till en person som är infekterad med ett virus, om säkerhetsåtgärder inte observeras

    Till skillnad från annan hepatit är metoder för överföring av hepatit C huvudsakligen förknippade med blod. Det är omöjligt att få en hepatit C på hushållets sätt! Varken handskakningar eller vanliga kyssar (icke-sexuell natur) och kommunikation, eller användningen av hushållsartiklar kan överföra hepatit C! Ta inte bara manikyr och rakningstillbehör från en person som lider av hepatit C! Vid första hjälpen för skador borde patienter med hepatit C alltid ha handskar! Viruset dör vid kokning efter några minuter och vid tvätt vid 60 ° C - efter trettio minuter. Frysning dödar inte viruset. Mordseffekt på virusets UV-strålning. Efter 16 timmar dör viruset vid rumstemperatur!

    PCR-diagnostik

    PCR är den vanligaste och korrekta metoden för att bestämma viruset och dess kvantitativa förmåga. Metoden kan upptäcka virus i olika former och diagnostisera lilla kända sjukdomar.

    PCR-analys (polymeraskedjereaktion) utförs genom blodprovtagning och bestämning av viralt RNA i det.

    Specifika enzymer sättes till blodprover och bestäms i en speciell reaktor. Det finns kloning av celler.

    För det första är en cell uppdelad i två kopior, varefter var och en av kopiorna är indelad i två ytterligare. Således, efter syntes av kopior, uppträder hundratals DNA-celler.

    DNA kan jämföras med en databas med information om olika patogener och identifiera infektion i de tidiga stadierna av sjukdomen.

    Fördelar med PCR-metoden:

    • många diagnosmetoder avslöjar endast närvaron av viruset genom att isolera i blodprodukterna av vital aktivitet hos infektiösa mikroorganismer. PCR-metoden indikerar direkt orsakssambandet för infektionen;
    • Specificiteten av PCR är att ett unikt DNA-fragment detekteras i det blodprov som undersöks. Detta eliminerar risken för ett falskt resultat;
    • PCR kan detektera ensamma infektionsceller och diagnostisera flera patogener i ett enda blodprov.

    Kvalitativ analys

    Hjälper till att upptäcka viruset i blodet. Om resultatet är positivt bör du fortsätta undersökningen och genomföra en kvantitativ analys som bestämmer sjukdomsfasen och ger läkare möjlighet att planera den mest fördelaktiga behandlingstaktiken. Vid genomförandet av denna analys är endast två slutsatser tillåtna:

    • "Upptäckt". Bevis på närvaron av viruset i blodet. Ett liknande resultat anses positivt. Blod RNA har redan upptäckts, som redan har börjat utvecklas, infekterar friska celler och slår i levern.
    • "Ej upptäckt". Han säger att det inte finns något hepatit C-RNA i blodprovet. Det finns även fall där virusets koncentration i provet är försumbar och faller inte inom analysens känslighet. Det är värt att notera att analysen avslöjar infektionen den tionde dagen efter infektion, vilket gör det möjligt att identifiera viruset före dess betydande yttre manifestationer.

    Kvantitativ analys

    Detekterar koncentrationen av virusets genetiska material i en specifik volym blod. Detta gör det inte bara möjligt att bestämma svårighetsgraden av sjukdomen, men låter dig också se den fullständiga kliniska bilden av sjukdomen (inklusive behandling). Som ett resultat av denna analys kan det bara vara 3 slutsatser:

    Resultatet är "Positivt". Resultatet i det numeriska indexet återspeglar viral belastningen. Virusets koncentration bestämmer virusets mängd i 1 milliliter, vilket är lika med 1 kubikcentimeter blod. Enheterna i denna analys är ME / ml (internationellt accepterade enheter per milliliter). Om koncentrationen av viruspartiklar är mindre än 8x10 000 IE / ml är behandlingen effektiv, om det tvärtom är nödvändigt att ändra behandlingens taktik.

    Om virusbelastningen under de första veckorna av behandlingen sjunker till 60%, så är effektiviteten av behandlingen hög. Den låga nivån är lika med 400 000 IE / ml, och den höga nivån är från 1 000 000 IE / ml. Viral belastning bestämmer graden av sjukdomen och möjligheten till överföring. Med en hög nivå av viral cellkoncentration i blodet är risken att överföra sjukdomen antingen vertikalt eller sexuellt ganska stor.

    • Resultatet är "Ogiltigt". Detta resultat innebär att en kvalitativ analys av viruset i kroppen upptäcktes, men den kvantitativa analysen kunde inte bestämma dess koncentration i blodet. Detta inträffar när mängden RNA-partiklar av viruset i blodet ligger under detekteringsområdet.
    • Resultatet "Ej detekterat". Tolkning av analysen betyder frånvaron av RNA-celler av hepatit C i ett blodprov.

    Kvantitativ analys av PRC utförs i alla skeden av sjukdomen. För att bestämma den optimala behandlingen utförs testen på datumen: (4, 12, 16 och 24: e veckan). Om resultaten visar en minskning av virusbelastningen, kan behandlingen betraktas som effektiv. Efter avslutad behandling utförs den kvantitativa analysen för att detektera en återkommande, det vill säga att detektera viruset efter att ha reducerat sin aktivitet till ett minimum.

    01 Principer för diagnos av HCV

    Serologisk diagnos av hepatit C baseras på detektion av en unik markörer av humana blodplasmaprover av hepatit C-virus: antikroppar mot antigener av HCV tillhör immunglobulin G och M (anti-HCV-IgG och anti-HCV-IgM), och nukleinsyrasekvensen patogen syra (RNA HCV).

    Metodsprincipen baseras på detektering av specifika fragment av DNA (RNA) av olika biologiska objekt i det studerade materialet, deras selektiva syntes och vidare detektion av produkterna i amplifieringsreaktionen av dessa fragment.

    Kvantitativa modifieringar av PCR ger en uppfattning om HB, vilket är avgörande för prognosen och kontrollen av terapi för viral hepatit C.

    02 Beräkning av viral belastning för viral hepatit C

    Vanligtvis kan HCV RNA detekteras i blodet under den första veckan efter infektion före förekomst av anti-HCV (anti-HCV) som inte kan detekteras inom de första 8-12 veckorna. Båda markörer av HCV-infektion kan detekteras i blodet i olika kombinationer, vilket kräver en korrekt klinisk tolkning.

    Därför är lämpligt för att bilda den slutliga diagnosen, speciellt i att identifiera endast en av de två HCV-markörer utföra återkommande testning av blodprovet med avseende på anti-HCV och HCV RNA.

    Under studiens gång utförs detektion och räkning av antalet kopior av HCV RNA genom realtid PCR.

    I klinisk praxis, är de mest perfekta PCR diagnostik realtids-PCR, vilket utesluter kontaminering av proven och bestämmer närvaron och mängden av HCV-RNA i två veckor efter den förväntade infektion. Denna teknik bestämmer bland annat genotypen av ett virus med en virusbelastning för en studie. Testets kliniska specificitet är 100%. Standardvärdet av testvärden är från 15 till 100 miljoner IE / ml. Genotyperna av virus 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6) avslöjas. Gränsvärdet för det positiva testet, när virusets RNA kan detekteras, är 15 IE / ml. Den största fördelen med PCR-metoden är den mycket höga känsligheten hos analysen - till en kopia av genomiskt DNA från det infektiösa medlet i testprovet i nested-PCR-modifiering.

    PCR är en modern, mycket känslig metod. Men fördelen - hög känslighet - är också dess sårbarhet, det vill säga leder till falska resultat även när analysen av högt kvalificerade yrkesverksamma i välutrustade laboratorier... Resultaten av studier i olika laboratorier ofta inte sammanfaller, vilket indikerar behovet av standardisering av diagnossystem för PCR-diagnostik och ökad uppmärksamhet på att utföra den här typen av forskning. Den höga kostnaden, analysens längd, metodens komplexitet och skillnaden mellan resultaten som erhållits i olika laboratorier begränsar användningen av PCR vid brett bruk.

    Resultaten av studien visas på en blankett med en tabell som visar den detekterade nivån av virusets RNA (antal kopior eller koncentration i IE / ml). Andra matematiska symboler kan användas för att uttrycka ME / ml-värdet, till exempel 1. 9 * 10 ^ 5 (1. 9 för 10 till 5 grader).

    03 Indikationer för forskning

    Huvudindikationerna för att bestämma virusbelastningen i viral hepatit C är:

    • laboratoriebekräftad kvalitativ närvaro av RNA i blodserumet;
    • Förekomsten av den läkare som ansvarar för att välja ett läkemedel för användning av antivirala läkemedel.
    • Behovet av en noggrann bedömning av effektiviteten av behandlingen.

    Studien kräver ingen speciell beredning av patienten.

    04 Tolkning av resultat

    Normalt finns det ingen RNA för patogenen, i en frisk person, det vill säga BH är noll. BH uttrycks i internationella enheter per ml. En stor BH (> 400 000 IE / ml) och en liten BH (100 000 000 IE / ml) isoleras

    För att övervaka effekten av antiviral terapi bör realtids PCR-analys med en minimi-detekteringsnivå på 15 IE / ml användas. För att skilja mellan lågt HH och högt är nivån av viralt RNA 500 000 IE / ml.

    Nivån av viral belastning övervakas både i akut och kronisk hepatit C. Nivån av viral belastning är fastställd under behandlingen, efter avslutad behandling och 24 veckor efter behandlingen.

    Hos gravida kvinnor är denna indikator fastställd för diagnostiska ändamål, eftersom antiviral terapi under graviditeten inte utförs.

    Data på nivån av virusbelastningen används för att välja och kontrollera antiviral terapi, men de ger inte i något fall en uppfattning om sjukdomsfallet, särskilt vid kroniska former av HCV med normal leverfunktion.

    Vid klinisk uppföljning bestämmer patienterna en gång om året kvalitativt HCV RNA i blodet. Om det kvalitativa resultatet är positivt, utförs en kvantitativ analys med definitionen av virusbelastningen.

    05 Slutsats

    Hittills används en rad olika metoder för att diagnostisera HCV, bland annat är kvantifieringen av nivån av virusbelastningen avgörande för patientens framgångsrika behandling. Fördelarna med denna metod är hög tillförlitlighet, känslighet och klinisk specificitet. Dessutom är nivån av virusbelastning en mycket tydlig indikator på effektiviteten av behandlingen med antivirala läkemedel, både i monoterapi och i kombinationer.

    Men på grundval av nivån av viral belastning, kan vi under inga omständigheter bedöma kursen och resultatet av sjukdomen. Därför är denna indikator informativ för den behandlande läkaren endast i kombination med andra data - resultaten av fibroscanning och biopsi med mikroskopi av leverceller. Således ersätter beräkningen av nivån av virusbelastningen under inga omständigheter, men kompletterar bara de befintliga diagnostiska metoderna som används i klinisk praxis.

    Nivån på virusbelastningen är den mest tillförlitliga indikatorn, vilket gör det möjligt att på ett tillförlitligt sätt fastställa närvaron av viruset hos en patient och att kontrollera behandlingen.


    Relaterade Artiklar Hepatit